Przeciwciała w surowicy do kanałów wapniowych typu L u pacjentów z stwardnieniem zanikowym bocznym czesc 4

Po przepłukaniu studzienek roztworem soli-Tween, wprowadzono fosforan para-nitrofenylu (0,4 mg na mililitr) w buforze składającym się z 0,1 mola węglanu sodu i mmol chlorku magnezu na litr przy pH 9,5 (Sigma Chemical) do studzienek (95 .l na studzienkę do mikromiareczkowania) i aktywność fosfatazy alkalicznej ze związanych kompleksów przeciwciał badano spektrofotometrycznie na czytniku mikropłytek Bio-Tek 8000 (Bio-Tek, Winooski, Vt.) w 37 ° C przez 405 nm filtr (z równoczesnym automatycznym odejmowaniem odczytów gęstości optycznej tła przy 490 nm). Ocena postępów choroby
Pacjentów w Klinice Stwardnienia Zanikowego Baylor Baylor poddawano comiesięcznym lub dwumiesięcznym testom klinicznym.36 Wyniki testów oceniających stopień niepełnosprawności ruchowej dla każdego pacjenta wykreślono w funkcji czasu w miesiącach. Pacjentów włączono do oceny progresji choroby, gdy szybkość zmian w ich ocenie niepełnosprawności (progresja choroby) można modelować za pomocą regresji liniowej (r2> 0,9) i gdy dostępne były 12 miesięcy danych w czasie upuszczania krwi. Pacjenci przyjmujący leki immunosupresyjne byli wykluczeni z tej analizy.
Analiza statystyczna
Wszystkie oceny statystyczne przeprowadzono na komputerze zgodnym z IBM 386/33, z pakietem statystycznych programów komputerowych STATA (Computing Resource Center, Los Angeles).
Wyniki
Reaktywność VGCC typu L z surowicą pacjenta w teście ELISA
Rysunek 1. Rysunek 1. Porównanie ilościowe wiązania surowicy z VGCC typu L z mięśni szkieletowych. Przedstawiono wyniki testu ELISA dla poszczególnych próbek surowicy po obróbce cytrynianem (rozcieńczenie 1: 1250) badanych względem oczyszczonego antygenu VGCC typu L. Średnie wartości dla poszczególnych próbek surowicy testowanych w dwóch studzienkach w trzech doświadczeniach są przedstawione po 3-godzinnej inkubacji w 37 ° C, a następnie 15 godzinach inkubacji w 25 ° C. Pozioma linia reprezentuje wartość 2 SD powyżej połączonych średnich wartości kontrolnych. Większość reakcji w próbkach surowicy od pacjentów ze stwardnieniem zanikowym bocznym (ALS) była wykrywalna w rozcieńczeniach 1: 6250 do 1: 25 000. GBS oznacza zespół Guillain-Barré, zespół LES-Lamberta-Eatona, inne MND inne rodzaje chorób neuronów ruchowych, normalne prawidłowe kontrole, brak chorób autoimmunologicznych AD i chorobę autoimmunologiczną AD.
Tabela 2. Tabela 2. Wiązanie przeciwciała surowicy od pacjentów badania do VGCC L typu, jak zmierzono za pomocą testu ELISA. Surowicze IgG od pacjentów ze stwardnieniem zanikowym bocznym wykazały wybiórcze i czułe wiązanie VGCC typu L w teście ELISA. Próbki surowic od 48 pacjentów ze stwardnieniem zanikowym bocznym, 25 osób zdrowych, 17 pacjentów z grupy kontrolnej z autoimmunologicznymi chorobami neurologicznymi, 18 pacjentów z niewydolnością autoimmunologiczną, 9 pacjentów z zespołem Lamberta-Eatona, 15 pacjentów z zespołem Guillain-Barré i 12 badano pacjentów z innymi typami neuronów ruchowych w celu określenia ich reaktywności na wysoce oczyszczony antygen VGCC typu L z mięśni szkieletowych królika (stężenie plamienia, 20 fmoli na studzienkę do mikromiareczkowania). Większość próbek surowicy z grup kontrolnych reagowała minimalnie z związanymi plastycznie VGCC typu L (ryc
[podobne: tarczyca u mężczyzn objawy, lekarz medycyny pracy warszawa wola, clemastinum hasco ]