Przeciwciała w surowicy do kanałów wapniowych typu L u pacjentów z stwardnieniem zanikowym bocznym ad 7

Dłuższe czasy reakcji były wymagane, gdy testowano próbki surowicy. Szybkości reakcji wzrastały wraz ze wzrostem stężenia IgG (> 10 .g na test) lub wysokim mianem surowicy (rozcieńczenie, <1: 250), ale wiązały się z jednoczesnym zmniejszeniem swoistości reakcji. Największy stopień swoistości wiązania IgG odnotowano przy niższych stężeniach IgG (<5 .g na test) lub większych rozcieńczeniach surowicy (> 1: 1250). Swoistość reakcji wzrosła także, gdy użyto wysoko oczyszczonego antygenu, chociaż szybkości reakcji spadły zarówno dla pacjenta IgG, jak i przeciwciała monoklonalnego. Niespecyficznie związane drugie przeciwciało nie przyczyniło się do szybkości reakcji, jak zbadano z pierwszorzędowymi przeciwciałami, z których usunięto regiony Fc. Duże reakcje tła obserwowano przy 3 procentach próbek surowicy i 10 procent próbek IgG dodanych do blokowanych płytek ELISA bez antygenu, i te wyniki odjęto od wartości wiązania dla płytek powleczonych antygenem w celu uzyskania specyficznych danych dotyczących wiązania VGCC. .
Relacja odpowiedzi do testu ELISA i postępu choroby
Rycina 4. Rycina 4. Reakcje ELISA w surowicy jako funkcja poszczególnych stopni postępu choroby. W panelu A wskaźniki postępu choroby u 38 spośród 48 pacjentów ze stwardnieniem zanikowym bocznym są wykreślane jako funkcja reaktywności surowicy w teście ELISA. Linię uzyskano za pomocą analizy regresji metodą najmniejszych kwadratów dla tych danych (skorygowany r2, 0.8). Te same dane są przedstawione w panelu B, z pacjentami podzielonymi na dwie populacje na podstawie ich reakcji na ELISA: wartości dla populacji były mniejsze niż 2 SD powyżej wartości dla populacji kontrolnej, a wartości dla populacji 2 były większe niż 2 SD powyżej wartości kontrolnych. Te populacje wykreślono w funkcji szybkości progresji choroby. Zamknięte pola reprezentują od 25 do 75 percentyla, pionowa linia w każdym polu reprezentuje medianę, a małe pionowe linie powyżej znaczników zakresu populacji wskazują indywidualne stawki w każdej populacji. Wskaźniki progresji choroby obliczono na podstawie wyników seryjnej progresji choroby i wykreślono jako funkcję czasu od pojawienia się pierwszych objawów. Te wyniki, od niskiego poziomu 30 punktów dla osób zdrowych do wysokiego 164 punktów dla pacjentów z maksymalną dysfunkcją ruchową, określono z miesięcznych lub dwumiesięcznych ocen funkcji opuszkowej, funkcji oddechowej, siły mięśni kończyn i układu kostnego. funkcja mięśniowa.
Wartościowe tempo progresji choroby u 38 pacjentów ze stwardnieniem zanikowym bocznym bezpośrednio korelowało z ich reaktywnością w surowicy w teście ELISA (współczynnik korelacji rang Spearmana, 0,62) (ryc. 4A). W przypadku grupowania tych pacjentów zgodnie z ich reakcjami na surowicę w teście ELISA, widoczne były dwie prędkości progresji choroby (dwuelementowa suma rang Wilcoxona z statystyka, -4,17; P <0,001) (ryc. 4B); stwierdzono silną statystyczną korelację pomiędzy pacjentami z powolnym przebiegiem klinicznym i słabą reaktywnością w surowicy w teście ELISA oraz pomiędzy pacjentami z szybszym postępem choroby i silną reaktywnością w surowicy w teście ELISA. Jednak stopień reaktywności surowicy w teście ELISA nie korelował z nasileniem choroby w czasie upuszczania krwi (współczynnik korelacji rang Spearmana, 0,16).
Reaktywność surowicy na ELISA wydawała się być stała w czasie, co sprawdzono trzykrotnie w ciągu 20 miesięcy w próbkach od trzech pacjentów ze stwardnieniem zanikowym bocznym (zmienność między mianami próbek, <20 procent dla każdego pacjenta), pomimo oczywistego pogorszenia funkcjonalnego w tych badaniach. pacjentów w tym samym okresie [patrz też: półpasiec objawy zdjęcia, tarczyca u mężczyzn objawy, pci medycyna ]